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讓專(zhuān)業(yè)人員告訴你美國伯樂(lè )CFX96PCR儀的實(shí)驗操作注意事項
點(diǎn)擊次數:1757 更新時(shí)間:2021-09-09

    簡(jiǎn)單的說(shuō),美國伯樂(lè )CFX96 PCR儀就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復制。

    目前,常用的技術(shù),可以將一段基因復制為原來(lái)的一百億至一千億倍。根據DNA擴增的目的和檢測的標準,可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀四類(lèi)。

    美國伯樂(lè )CFX96 PCR儀的實(shí)驗操作注意事項:

    盡管擴增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴增反應是謹慎認真,在樣品的收集、抽提和擴增的所有環(huán)節都應該注意:

    1.戴一次性手套,若不小心濺上反應液,立即更換手套;

    2.使用一次性吸頭,嚴禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長(cháng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染;

    3.避免反應液飛濺,打開(kāi)反應管時(shí)為避免此種情況,開(kāi)蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上,應立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;

    4.操作多份樣品時(shí),制備反應混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應的精確度;

    5.最后加入反應模板,加入后蓋緊反應管;

    6.操作時(shí)設立陰陽(yáng)性對照和空白對照,即可驗證PCR反應的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴增系統的可信性;

    7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標本DNA的污染,最好使用可替換或高壓處理的加樣器。

    如沒(méi)有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過(guò)程中加樣器應該專(zhuān)用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區;

    8.重復實(shí)驗,驗證結果,慎下結論。