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伯樂(lè )轉印槽使用方法步驟：

全程請戴手套操作，以免污染伯樂(lè )轉印槽！

1）電泳后SDS-PAGE 膠片浸在轉印緩沖液中，洗2~3 次，每次10min.

2）取出伯樂(lè )轉印槽，先小心放一攪拌子在底部，再倒一半轉印緩沖液。

3）取轉印紙切成約如膠片大小，先在方形培養皿中以少許甲醇浸濕數秒鐘，再置入伯樂(lè )轉印槽中的緩沖液10 min 后使用。 另取兩張濾紙，以及兩片方形海綿墊，都放在伯樂(lè )轉印槽的緩沖液中備用。

4）取出轉印夾打開(kāi)平放，先墊一張方形海棉墊，鋪上一張濕濾紙，小心平鋪SDS-PAGE膠上去，然后小心迭上已潤濕的轉印紙，用涂菌玻璃棒趕出氣泡；轉印紙再滴上數滴緩沖液后，加蓋一層濾紙，及另一張海綿，也都不可陷入氣泡，即可把整個(gè)轉印三明治卡夾裝好。

膠迭到轉印紙時(shí)，一次成功，不要重作，否則蛋白質(zhì)色帶可能會(huì )印上去，后產(chǎn)生重迭影像。

5）將轉印三明治置入已經(jīng)放有一半轉印緩沖液的伯樂(lè )轉印槽中，注意有轉印紙的那一面向正極（紅色），膠片那面向負極（黑色）。

6）當三明治都放入伯樂(lè )轉印槽后，以轉印緩沖液蓋滿(mǎn)所有的三明治，小心動(dòng)一動(dòng)卡夾，除去附在卡夾內外的氣泡，蓋上蓋子，放到一攪拌器上，打開(kāi)攪拌器開(kāi)始攪拌，同時(shí)接好電源，裝置完成后放置10 min.

7）以300mA開(kāi)始轉印，溫度會(huì )漸漸上升，轉印1.5 h左右 后中止轉印，取出轉印三明治，打開(kāi)后依次取出轉印紙及膠。

具體轉印條件要根據蛋白的大小進(jìn)行優(yōu)化，注意低溫。

8）轉印后的膠片可以繼續進(jìn)行染色，看有無(wú)蛋白質(zhì)殘留。若電泳時(shí)加有藍色標準蛋白質(zhì)marker（SeeBlue），則可在轉印紙上看到藍色的色帶，確定轉印成功，并可評估轉印效率。