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    熒光定量PCR儀，由熒光定量系統和計算機組成，用來(lái)監測循環(huán)過(guò)程的熒光。與實(shí)時(shí)設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過(guò)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數的圖表。原始數據收集后可以開(kāi)始分析。實(shí)時(shí)設備的軟件能使收集到的數據進(jìn)行正?；幚韥?lái)彌補背景熒光的差異。正?；罂梢栽O定域值水平，這就是分析熒光數據的水平。

　　在qPCR進(jìn)程中，隨著(zhù)產(chǎn)物的積累，熒光信號的強度等比加強。每經(jīng)過(guò)一次循環(huán)，收集一次熒光信號，即可得到一個(gè)熒光擴增曲線(xiàn)，根據熒光強度的變化即可監測產(chǎn)物量的變化。熒光擴增曲線(xiàn)可分為三個(gè)階段，即熒光背景信號階段、熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光信號指數擴增階段，PCR產(chǎn)物量的對數值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，因此可以在該階段進(jìn)行定量分析。為了便于對所檢測樣本進(jìn)行比較，在指數期需要設定一個(gè)熒光信號的閾值。檢測到的熒光信號超過(guò)閾值則被認為是真正的信號。熒光信號由本底進(jìn)入指數增長(cháng)階段的閾值所對應的循環(huán)次數稱(chēng)為Ct值。模板的Ct值與其起始拷貝數的對數存在線(xiàn)性關(guān)系，起始拷貝數越多，則Ct值越小利用已知起始拷貝數的標準品及其相應的Ct值可繪制出標準曲線(xiàn)，測得未知樣品的Ct值后，根據標準曲線(xiàn)便可準確計算出該樣品的起始拷貝數。