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淺談美國伯樂(lè )S1000基因擴增儀的工作原理
點(diǎn)擊次數:1181 更新時(shí)間:2022-01-20
 
  美國伯樂(lè )S1000基因擴增儀主要用于用于科研及臨床的基因擴增、定性PCR基因擴增、熒光/酶免終點(diǎn)定量DNA基因擴增、基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增等?;驍U增儀適合國內外各種PCR試劑盒傳染病類(lèi)、腫瘤類(lèi)、科研類(lèi)。進(jìn)口基因擴增儀主要由外殼、變溫反應腔、散熱系統、加熱系統、制冷系統、電子控制系統、供電系統、人機界面等各部分組成?;驍U增儀廣泛應用于各級各類(lèi)醫療機構、大學(xué)及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫站、食品企業(yè)及乳品廠(chǎng)等。
 
  美國伯樂(lè )S1000基因擴增儀的原理:
 
  基因擴增儀是利用PCR技術(shù)對特定基因做體外的大量合成,用于以檢測DNA/RNA為目的的各種基因分析。
 
  PCR反應一般設置20~40次循環(huán),每一循環(huán)包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應。每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個(gè)循環(huán)的模板。PCR的擴增效率很高,如果循環(huán)次數是30次,那么新生DNA段理論上達到230拷貝(約為109個(gè)分子)。PCR反應每個(gè)循環(huán)的三個(gè)基本反應步驟如下:
 
 ?、倌0錎NA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA產(chǎn)物解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;
 
 ?、谀0錎NA與引物的退火(復性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;
 
 ?、垡锏难由欤簻囟壬?2℃左右,DNA模板-引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。重復循環(huán)變性-退火-延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬(wàn)倍。到達平臺期所需循環(huán)次數取決于樣品中模板的拷貝。